Teknik Mikkroskop Cahaya oleh:Yulita Basilia Midwife

Teknik Mikroskop Cahaya

                Mikroba hidup umumnya dapat dilihat menggunakan preparat basah dab prepart hanging drop (tetes gantung). Untuk melihat mikrobia dengan jelas dan mempelajari anatominya,digunakan bermacam-macam teknik pengecatan.

a.       Pengecatan sederhana

Pengecatan Sederhana adalah pengecatan spesimen dengan cat basa yang memberikan konras yang baik antara spesimen dan latar belakangnya.

b.      Pengecatan negatif

Pengecatan negatif adalah  pengecatan latar belakang  dengan cat asam sehingga spesimen dapat dibedakan dari latar belakangnya. Contoh pengecatan negatif adalah pengecatan kapsula. Pengecatan negatif dan pengecatan sederhana sering dikombinasikan untuk menambah kontras.

c.       Pengecatan diferensial

Oengecatan diferensial adalah pengecatan spesimen dengan dua atau lebih cat basa untuk membedakan struktur seluler. Pengecatan gram dan pengecatan acid fast contohnya.

d.      Pengecatan fluoresen

Pengecatan fluoresen adalah pengecatan spesimen dengan cat yang berfluoresensi.

Teknik Mikroskop Elektron

                Spesimen untuk mikroskop transmisi biasanya difiksasi untuk mencegah dekomposisi,dicetak dalam plastik untuk menjaga bentuk spesimen dan diiris tipis dengan ultra mikrotom. Teknik metal shadowing (teknik pembayangan logam) digunakan untuk memperlihatkan gambaran tiga dimensi.

Umumnya digunakan untuk mempelajari bentuk virus yang utuh dan bakteri.

Spesimen dilapisi dengan logam berat seperti emas atau paladium yang umumnya mengendap di sudut  spesimen,sehingga menciptakan bayangan spesimen.

                Teknik freeze fracture (teknik pemecahan beku) untuk menggambarkan permukaan organela dan membran. Spesimen secepatnya dibekukan dalam freon 12 atau refrigerant  sampai -100⁰C,kkemudian  diiris dalam vakum untuk memecah sel dan organelanya. Pecahan spesimen dilapisi dengan platinum dan karbon untuk membuat replika logam spesimennya. Replikanya terlihat tiga dimensi. Spesimennya untuk SEM dikering bekukan dan kemudian dilapisi dengan lapisan logam berat eperti emas dan paladium yang melengkapi elektron sekunder untuk menghasilkan gambar.